新型冠状病毒标本采集要求
武汉千麦医学检验实验室作为达到政府要求的检验实验室之一，目前正在紧锣密鼓的开展新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测工作，特制定本技术标本采集要求。主要介绍目前已经比较成熟、易于实施的核酸检测方法的标本采集要求。
（一）采集对象
新型冠状病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者，其他需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者，或其他需要进一步筛查检测的环境或生物材料（如溯源分析）。
(二)标本采集要求
1、从事新型冠状病毒检测标本采集的技术人员应经过生物安全培训（培训合格）和具备相应的实验技能。采样人员专业防护装备（personal protective equipment，PPE）要求：N95口罩、护目镜、防护服、乳胶手套、防水靴套；如果接触患者血液、体液、分泌物或排泄物时，戴双层乳胶手套。
2、根据实验室检测工作的需要，可结合病程多次采样。
（三）标本采集种类
每个病例必须采集急性期呼吸道标本和急性期血液标本；重症病例优先采集下呼吸道标本（如支气管或肺泡灌洗液等），可根据临床表现与采样时间间隔进行采集。
标本种类：
1、上呼吸道标本：包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物。
2、下呼吸道标本：包括深咳痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液、肺组织活检标本。
为了减少污染流程可相对固定一种样本类型及操作简便的方法，以便更好实施（除特殊情况下需采集特定的样本）。对自动核酸提取方法而言，采用带病毒保存液的咽拭子或鼻咽拭子可避免开盖添加生理盐水的步骤。
（四）标本采集方法
1、咽拭子：用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。
2、鼻拭子：将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。
3、鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集器）。
4、深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于含3ml采样液的50ml螺口塑料管中。
5、支气管灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器1次（亦可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集）。
6、肺泡灌洗液：局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支管，将其顶端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水，每次30~50 ml，总量100~250 ml，不应超过300 ml。
（五）标本包装
标本采集后在生物安全二级实验室生物安全柜内分装。
1、所有标本应放在大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里，拧紧。容器外注明样本编号、种类、姓名及采样日期。
2、将密闭后的标本放入大小合适的塑料袋内密封，每袋装一份标本。
（六）标本保存
用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。血清可在4℃存放3天，-20℃以下可长期保存。应设立专库或专柜单独保存标本。标本运送期间应避免反复冻融。
（七）灭活处理
为了减少感染样本对人和环境的潜在危害，我们强调：
呼吸道样本（包括咽拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽取物、痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等）58℃ 1小时 干浴（烤箱或恒温箱）
血清标本：56℃ 30 min 水浴 （恒温水浴箱）
但必须强调的是，病毒灭活效果与其所在基质成分有关，因实验条件所限，我们无法评估该方法灭活病毒的真实效果。此外，我们选择干浴后静置10 min是基于我们现有的样本量及实验条件。理论上，干浴后静置的时间越长，产生气溶胶的风险越小。基于此，干浴处理后的样本仍视为具有感染性，其后续处理应视同未灭活的样本。
样本要求及报告时间：
项目
名称
新型冠状病毒核酸检测
样本
要求
咽拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽取物、痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等
专用
耗材
带病毒保存液的咽拭子或鼻咽拭子
